Formation, Videnskab
Mikroskopiske forskningsmetoder i mikrobiologi
представляют собой способы изучения разнообразных объектов с использованием специального оборудования. Mikroskopiske forskningsmetoder er måder at studere en række genstande ved hjælp af specialudstyr. Det giver os mulighed for at overveje strukturen af stoffer og organismer, hvis omfang ligger uden for grænserne for det menneskelige øjes løshed. I artiklen vil vi lave en kort analyse af mikroskopiske undersøgelsesmetoder.
Generelle oplysninger
используют в своей практике разные специалисты. Moderne metoder til mikroskopisk forskning anvendes af forskellige specialister i deres praksis. Blandt dem er virologer, cytologer, hæmatologer, morfologer og andre. De vigtigste metoder til mikroskopisk forskning har været kendt i lang tid. Først og fremmest er dette lyset af visning af objekter. I de senere år er andre teknologier blevet introduceret aktivt i praksis. . Så erhvervet popularitet en fase-kontrast, luminescerende, interferens, polarisation, infrarød, ultraviolet stereoskopisk undersøgelsesmetode . De er alle baseret på en række lysegenskaber. . Derudover anvendes elektronmikroskopiske undersøgelsesmetoder i vid udstrækning. Disse metoder giver dig mulighed for at vise objekter ved hjælp af en rettet flux af ladede partikler. Det er værd at bemærke, at sådanne metoder til studier ikke kun anvendes i biologi og medicin. в промышленности. En mikroskopisk metode til at studere metaller og legeringer i industrien er ganske populær. En sådan undersøgelse giver os mulighed for at evaluere forbindelsens opførsel, udvikle teknologier for at minimere sandsynligheden for ødelæggelse og styrkelse af styrke.
Lysmetoder: karakteristisk
и других объектов базируются на различной разрешающей способности оборудования. Sådanne mikroskopiske metoder til at studere mikroorganismer og andre objekter er baseret på forskellige opløsninger af udstyr. Vigtige faktorer i dette tilfælde er strålens retning, egenskaberne ved selve objektet. Sidstnævnte kan især være gennemsigtig eller uigennemsigtig. I overensstemmelse med objektets egenskaber ændrer de fysiske egenskaber af lysfluxet - lysstyrke og farve forårsaget af amplitude og bølgelængde, planet, fase og retning af bølgeforplantning - forandring. . Ved anvendelsen af disse egenskaber konstrueres forskellige mikroskopiske undersøgelsesmetoder .
Specificitet
For at studere lys er objekter normalt malet. Dette giver os mulighed for at identificere og beskrive nogle af deres egenskaber. Det er nødvendigt, at vævene er faste, da farven afslører bestemte strukturer udelukkende i de dræbte celler. I levende elementer frigives farvestoffet som en vakuol i cytoplasmaet. Det maler ikke strukturen. Men ved hjælp af et lysmikroskop kan du også udforske levende genstande. Hertil kommer en vital metode til læring. I sådanne tilfælde anvendes en mørkfelt kondensator. Det er indbygget i et lysmikroskop.
Undersøgelse af uberørte genstande
Det udføres ved hjælp af fasekontrastmikroskopi. Denne metode er baseret på diffraktionen af strålen i overensstemmelse med objektets egenskaber. Under eksponeringsprocessen noteres fase- og bølgelængdeændringer. En translucent plade er til stede i objektivet i mikroskopet. Levende eller faste, men ikke-farvede genstande på grund af deres gennemsigtighed ændrer næsten ikke farven og amplituden af strålen, der passerer gennem dem, og fremkalder kun skiftet af bølgefasen. Men mens du går gennem objektet afviger lysfløjen fra pladen. Som følge heraf forekommer der en forskel i bølgelængde mellem strålerne gennem objektet og ind i lys baggrunden. Til en vis værdi opstår der en visuel effekt - et mørkt objekt vil være tydeligt synligt på en lys baggrund eller omvendt (i overensstemmelse med faseskiltens egenskaber). For at opnå det skal forskellen ikke være mindre end 1/4 af bølgelængden.
En antropisk metode
Det er en slags fase-kontrast metode. En antropisk metode indebærer brug af en linse med specialplader, der kun ændrer baggrundslysets farve og lysstyrke. Dette udvider i høj grad mulighederne for at studere uberørte levende objekter. , паразитологии при изучении растительных и животных клеток, простейших организмов. En mikroskopisk metode med fasekontrast anvendes i mikrobiologi , parasitologi i undersøgelsen af plante- og dyreceller, protozoer. I hæmatologi anvendes denne metode til at beregne og bestemme differentieringen af blod- og knoglemarvelementer.
Interferensmottagelser
решают в целом те же задачи, что и фазово-контрастные. Disse mikroskopiske metoder til forskning løser generelt de samme problemer som fasekontrast-dem. I sidstnævnte tilfælde kan specialister imidlertid kun observere konturer af objekter. методы исследования позволяют изучать их части, выполнять количественную оценку элементов. Interferensmikroskopiske forskningsmetoder giver dig mulighed for at studere deres dele, udføre en kvantitativ evaluering af elementerne. Dette er muligt på grund af bifurcation af lysstrålen. En strøm passerer gennem en partikel af objektet, og den anden går forbi. I mikroskopets okular konvergerer og interfererer de. Den resulterende faseforskel kan bestemmes af vægten af forskellige cellulære strukturer. Hvis det måles i rækkefølge med specificerede brydningsindekser, er det muligt at fastslå tykkelsen af ikke-faste væv og levende objekter, indholdet af proteiner i dem, koncentrationen af tørstof og vand mv. I overensstemmelse med de opnåede data er specialister i stand til indirekte at vurdere membranpermeabilitet, enzymaktivitet og cellulær metabolisme.
polarisering
Det udføres ved hjælp af Nicolas prismer eller filmy polaroids. De placeres mellem præparatet og lyskilden. позволяет изучать объекты с неоднородными свойствами. Polarisationsmikroskopisk metode til undersøgelse i mikrobiologi gør det muligt at studere genstande med inhomogene egenskaber. I isotropiske strukturer afhænger hastigheden af udbredelse af lys ikke af det valgte plan. I anisotrope systemer varierer hastigheden i overensstemmelse med lysretningen langs objektets tværgående eller langsgående akse. Hvis brydningsindekset langs strukturen er større end langs den tværgående, dannes en dobbelt positiv brydning. Dette er karakteristisk for mange biologiske objekter, hvor en streng molekylær orientering detekteres. De er alle anisotropiske. Denne kategori omfatter især myofibriller, neurofibriller, cilia i det cilierede epitel, collagenfibre og andre.
Polarisationsværdien
Sammenligning af arten af strålingsbrydningen og objektets anisotropi indeks gør det muligt at evaluere strukturens molekylære organisation. Polarisationsmetoden virker som en af de histologiske analysemetoder, anvendes i cytologi mv. I lyset er det muligt at studere ikke kun farvede genstande. Polarisationsmetoden gør det muligt at undersøge umilede og ikke-faste - indfødte præparater af vævssektioner.
Fluorescerende teknikker
De er baseret på nogle objekters egenskaber for at give en glød i den blå-violette del af spektret eller i UV-strålerne. Mange stoffer, for eksempel proteiner, nogle vitaminer, coenzymer, medicin, er udstyret med primær (egen) luminescens. Andre genstande begynder at gløde med tilsætning af fluorokromer - specielle farvestoffer. Disse additiver er selektivt eller diffus distribueret til individuelle cellulære strukturer eller kemiske forbindelser. Denne egenskab dannede grundlaget for anvendelsen af luminescensmikroskopi i histokemiske og cytologiske undersøgelser.
Anvendelsesområder
Ved hjælp af immunfluorescens registrerer specialister virale antigener og etablerer deres koncentration, identificerer vira, antistoffer og antigener, hormoner, forskellige metaboliske produkter og så videre. I denne henseende anvendes luminescerende metoder til materialeforskning ved diagnosticering af herpes, huder, viral hepatitis, influenza og andre infektioner . иммуно-флуоресцентный способ позволяет распознавать опухоли злокачественного характера, определять ишемические участки в сердце на ранних этапах инфаркта и пр. Mikroskopisk immuno-fluorescerende metode gør det muligt at genkende tumorer af malign karakter, at bestemme iskæmiske pletter i hjertet ved tidlige stadier af infarkt osv.
Brug af ultraviolet lys
Det er baseret på evnen hos en række stoffer indeholdt i levende celler, mikroorganismer eller faste, men umalet, gennemsigtigt i synligt lys for at absorbere UV-stråler med en bestemt bølgelængde. Dette er typisk, især for højmolekylære forbindelser. Disse omfatter proteiner, aromatiske syrer (methylalanin, tryptophan, tyrosin, etc.), nukleinsyrer, pyramidale og purinbaser og så videre. Ultraviolet mikroskopi giver os mulighed for at præcisere lokaliseringen og antallet af disse forbindelser. Når man studerer levende genstande, kan specialister observere ændringer i processerne i deres livsaktivitet.
derudover
Infrarødmikroskopi anvendes til undersøgelser af objekter, der er uigennemsigtige for lys og UV-stråler ved at absorbere dem ved strømningsstrukturer med en bølgelængde på 750-1200 nm. For at anvende denne metode er det ikke nødvendigt at prækemisk behandle præparaterne. Som regel anvendes den infrarøde metode i antropologi, zoologi og andre biologiske grene. Med hensyn til medicin anvendes denne metode hovedsageligt i oftalmologi og neuromorfologi. Undersøgelsen af volumetriske objekter udføres ved anvendelse af stereoskopisk mikroskopi. Udformningen af udstyret gør det muligt at observere venstre og højre øje i forskellige vinkler. Uigennemsigtige genstande undersøges ved en relativt lille stigning (ikke mere end 120 gange). Stereoskopiske metoder anvendes i mikrokirurgi, patomorfologi, i retsmedicin.
Elektronmikroskopi
Det bruges til at studere strukturen af celler og væv på makromolekylære og subcellulære niveauer. Elektronmikroskopi har gjort det muligt at gøre et kvantespring inden for forskningsområdet. Denne metode anvendes meget i biokemi, onkologi, virologi, morfologi, immunologi, genetik og andre grene. En væsentlig stigning i udstyrets opløsningskraft sikres ved strømmen af elektroner, der passerer gennem de elektromagnetiske felter i et vakuum. Sidstnævnte er igen skabt af specielle linser. Elektroner har evnen til at passere gennem objektets struktur eller afspejles fra dem med afvigelser fra forskellige vinkler. Som et resultat opstår der et display på enhedens fluorescerende skærm. Ved transmissionsmikroskopi opnås et fladt billede med henholdsvis et scanningsbillede, et volumenbillede.
Forudsætninger
Det er værd at bemærke, at objektet inden den elektroniske mikroskopiske undersøgelse udsættes for særlig træning. Især anvendes fysisk eller kemisk fiksering af væv og organismer. Sektions- og biopsiematerialet er desuden dehydreret, indlejret i epoxyharpikser, skåret med diamant- eller glasknive i ultra-tynde sektioner. Derefter modsættes og studeres de. I scanningsmikroskopet undersøges overfladerne af objekter. For at gøre dette sprøjtes de med specielle stoffer i et vakuumkammer.
Similar articles
Trending Now