Ksantoproteinovaya reaktionen til protein: tegn og formel ligning

For at fastslå den kvalitative sammensætning af mange fødevarer anvendte ksantoproteinovaya reaktion til proteinet. Tilstedeværelsen af aromatiske aminosyrer i blandingen vil ændre sig i en positiv testprøve farve.

Hvad er protein

Det kaldes også et protein, som er et byggemateriale til det levende legeme. Proteiner opretholde muskel størrelse, gendanne sårede og døde væv strukturer af forskellige organer, det være sig hår, hud og ledbånd. Med deres deltagelse, producerer røde blodlegemer, er underlagt den normale drift af mange hormoner og immunsystemets celler.

Dette er et kompleks molekyle, som er et polypeptid med en masse på over 6 ~ 10 ³ dalton. Protein strukturdannende aminosyrerester i et stort antal koblet peptidbinding.

Strukturen af proteiner

Det særlige ved disse stoffer sammenlignet med peptider med lav molekylvægt er, at de udviklede en tredimensional rumlig konstruktion, støttet virkninger med forskellige grader af tiltrækning. Proteiner besidder fire-struktur. For hver af dem har sine egne karakteristika.

Som grundlag for den primære organisation af molekyler afledt aminosyresekvens, struktur, som genkender ksantoproteinovaya reaktion til proteinet. Denne struktur er en periodisk gentaget peptidbinding -HN-CH-CO-, en selektiv del radikaler er sidekæderne i aminosyrer. De definerer yderligere egenskaber ved stoffet som helhed.

Den primære proteinstruktur anses stærk nok, er dette på grund af tilstedeværelsen af stærke kovalente interaktioner i peptidbindinger. Dannelsen af efterfølgende niveauer forekommer afhængigt af de egenskaber, der er fastsat i den indledende fase.

Dannelsen af den sekundære struktur er mulig på grund af snoning af aminosyresekvensen i en spiral, hvori hydrogenbindinger er etableret mellem vindingerne.

Tertiært niveau organisering af molekyler dannet ved anvendelse af en af en spiral på de andre fragmenter med forekomsten af alle mulige forbindelser mellem dem, med hydrogen, disulfid, kovalent eller ionisk forbindelse. Resultatet er foreningen i form af kugler.

Det rumlige arrangement af de tertiære strukturer med dannelsen af kemiske bindinger mellem dem fører til dannelsen af den endelige form af molekylet eller kvaternære niveauer.

aminosyrer

De forårsager de kemiske egenskaber af proteiner. Der er omkring 20 større aminosyrer, der udgør polypeptiderne i en anden sekvens. Dette også henvises sjælden aminocarboxylsyre i form hydroxyprolin og hydroxylysin afledt basisk peptid.

Som et tegn på anerkendelse ksantoproteinovaya protein reaktion, tilstedeværelsen af visse aminosyrer tilvejebringer farveændring af reagenser, hvilket tyder på tilstedeværelse af specifikke strukturer i deres sammensætning.

Som det viste sig, er de carboxylsyrer, der er opstået substitution af et hydrogenatom på aminogruppen.

Et eksempel struktur af molekylet kan tjene en strukturel formel glycin (HNH- HCH- COOH) som den simpleste aminosyre.

I dette tilfælde et af hydrogenerne _CH2 - kan være erstattet med en carbon længere radikal omfattende en benzenring, amino, sulfo, carboxy.

Hvad betyder ksantoproteinovaya reaktion

Til kvalitativ analyse af proteiner ved anvendelse af forskellige teknikker. Disse omfatter reaktioner:

• biuret med udseendet af violet farve;
• ninhydrin for at danne en blåviolet opløsning;
• formaldehyd med etableringen af en rød farve;
• Nogier til udfældning af grå-sort farve.

Ved udførelse af hver metode beviste tilstedeværelsen af proteiner og tilstedeværelsen af visse funktionelle grupper i deres molekyle.

Der ksantoproteinovaya reaktion til proteinet. Det kaldes også fordelingen Mulder. Den henviser til de farvereaktioner for proteiner, i hvilke der er aromatiske og heterocycliske aminosyre.

Et træk af en sådan prøve proces er nitrering syre salpetersyre cyklisk aminosyrerester især optagelsen af nitrogruppen til benzenringen.

Resultatet af denne proces er dannelsen af nitroforbindelser, der præcipiterede. Dette er den grundlæggende funktion ksantoproteinovaya reaktion.

Hvad bestemmes aminosyren

Ikke alle aminocarboxylsyre kan detekteres ved anvendelse sådan prøve. Det vigtigste træk ved ksantoproteinovaya protein påvisningsreaktionen - tilstedeværelsen af benzenringen eller heterocyklisk ring i molekylet aminosyrer.

Fordi proteinet isoleres fra aminocarboxylsyrer to aromatiske, hvor der er en phenylgruppe (phenylalanin i) og en hydroxyphenyl radikal (på tyrosin).

Med ksantoproteinovaya reaktionen bestemmes heterocyklisk aminosyre tryptophan, indol har en aromatisk kerne. Tilstedeværelsen af de ovennævnte forbindelser i proteinet giver den karakteristiske farveændring af testen miljø.

Hvad brug reagenser

Til udførelse af reaktionen ksantoproteinovaya skal forberede en 1% 's opløsning af æg protein eller vegetabilsk oprindelse.

Normalt bruges æg, som er opdelt til yderligere separation af proteinet fra æggeblommen. For en 1% opløsning af protein blev fortyndet på en tidobbelt mængde renset vand. Efter opløsning af det resulterende protein væske skal filtreres gennem flere lag osteklæde. Denne opløsning skal opbevares på et køligt sted.

Det er muligt at udføre reaktionen med et vegetabilsk protein. Til fremstilling af opløsningen anvendes hvedemel i en mængde på 0,04 kg. 0,16 liter renset vand. Ingredienserne blev blandet i en kolbe, som er bundet i 24 timer i et køligt sted ved en temperatur på ca. + 1 ° C. Ved udgangen af dag opløsningen blev omrørt, efterfulgt af filtrering deraf først med vat og derefter - et papir foldet filter. Den resulterende væske blev holdt i et køligt sted. Denne løsning er hovedsageligt til stede i albumin fraktion.

Til udførelse af reaktionen ksantoproteinovaya som den vigtigste anvendte reagens salpetersyre kone. Yderligere reagenser er en opløsning af 10% natriumhydroxid eller ammoniak, gelatineopløsningen og ukoncentreret phenol.

Metoden af

I et rent rør er fremstillet 1% proteinopløsning th æg eller mel i en mængde på 2 ml. Hertil sættes omkring 9 dråber koncentreret salpetersyre til flokkulering stoppet. Den resulterende blanding blev opvarmet, resulterende gule bundfald gradvist forsvinder, og dens farve går i opløsning.

Når væsken køler ned i røret langs væggen tilsættes ca. 9 dråber natriumhydroxid, koncentreret, hvilket er overskud for processen. Reaktionsmediet bliver alkalisk. Indholdet bliver orange farve i reagensglasset.

Funktioner af

Eftersom ksantoproteinovaya kaldet kvalitative reaktion på salpetersyre ved virkningen af proteinerne prøven udføres under inkluderet stinkskab. Overholde alle sikkerhedsforanstaltninger ved arbejde med koncentrerede kaustiske stoffer.

Frigivelsen af indholdet fra tuben kan forekomme under opvarmningsprocessen, der skal overvejes, når fastsættelse det i en holder og vælge hældningen.

Opkald koncentreret salpetersyre og natriumhydroxid bør kun under anvendelse af en glaspipette og pærer gummi forbudt pipette gennem munden.

Relative reaktion med phenol

For klarhed, proces og bekræftelse af tilstedeværelsen af phenylgrupperne udføres med en lignende prøve hydroxybenzen.

Røret gør 2 ml fortyndet phenol, derefter gradvist langs væggen, blev tilsat 2 ml koncentreret salpetersyre. Opløsningen blev underkastet opvarmning, hvorved det bliver gul. Denne reaktion er kvaliteten af tilstedeværelsen af benzenringen.

Proces hydroxybenzen nitreres med salpetersyre efterfulgt af dannelse af en blanding af p-nitrophenol og o-nitrophenol i en procentdel fra 15 til 35.

Sammenligningsforsøg med gelatine

For at bevise at ksantoproteinovaya reaktion til proteinet afslører en aminosyre med aromatisk struktur, brug proteiner, der ikke har en phenolisk gruppe.

I et rent rør er lavet 1% gelatine-opløsning i en mængde på 2 ml. Hertil sættes omkring 9 dråber koncentreret salpetersyre. Den resulterende blanding opvarmes. Opløsningen blev ikke farvet i gult, hvilket beviser den manglende aminosyrer med en aromatisk struktur. Nogle gange er der en svag gulfarvning af miljøet på grund af tilstedeværelsen af proteinurenheder.

kemiske ligninger

I totrinsreaktion kører ksantoproteinovaya proteiner. Formel første trin nitrering proces beskriver aminosyre-molekyler under anvendelse af koncentreret salpetersyre.

Et eksempel er fastgørelsen af nitrogruppen til tyrosin til dannelse nitrotyrosin og dinitrotirozina. I det første tilfælde til benzenringen er bundet en _{NO2-radikalen,} og den anden forbindelse har to hydrogenatomer er erstattet med _NO2. Kemisk formel ksantoproteinovaya tyrosin reaktionen repræsenteret ved omsætning med salpetersyre til dannelse nitrotyrosin molekyle.

Nitrering proces ledsages af overgangen farveløs farve i gul tone. Ved udførelse af denne reaktion med proteiner indeholdende aminosyreresterne phenylalanin eller tryptophan, og opløsningens farve ændres.

Det andet trin er reaktionsproduktet af nitrering af tyrosin molekyler, især nitrotyrosin, med ammonium- eller natriumhydroxid. Resultatet er et natrium- eller ammoniumsalt, hvor gul-orange farve. En sådan reaktion er relateret til muligheden for nitrotyrosin molekyler bevæge sig i quinoid formular. Efterfølgende salt dannet derfra Nitronic syre, som har et quinonsystem af konjugerede dobbeltbindinger.

Således slutter ksantoproteinovaya reaktion på proteiner. Ligningen ovenfor præsenterede andet trin.

resultater

Under analysen af fluider indeholdt i de tre rør, er referenceopløsningen fortyndet med phenol. Stoffer med en benzenring giver kvalitativ reaktion med salpetersyre. Som et resultat, den skifter farve af løsningen.

Som bekendt gelatine omfatter en hydrolyseret form af kollagen. Proteinet indeholder ikke den aromatiske struktur af aminosyrerne. Nogen farveændring af mediet ved omsætning med en syre.

I det tredje reagensglas der en positiv reaktion på proteiner ksantoproteinovaya. Konklusion kan drages som følger: alle proteiner med aromatisk struktur, hvad enten det er en phenylgruppe eller en indolring, givet farveændring opløsningen. Dette skyldes dannelsen af nitroforbindelser med en gul farve.

Udførelse af en farvereaktion viser tilstedeværelsen af forskellige kemiske strukturer i aminosyrer og proteiner. EKSEMPEL gelatine viser, at dens sammensætning omfatter aminocarboxylsyre ikke har en phenylgruppe eller en cyklisk struktur.

Med ksantoproteinovaya reaktion kan forklares ved gulfarvning af huden ved påføring på det en stærk salpetersyre. Den samme farve vil blive skummende mælk under hendes lignende analyse.

I klinisk laboratoriepraksis er denne farveprøve ikke anvendes til påvisning af protein i urinen. Dette skyldes, at den gule farve af selve urin.

Ksantoproteinovaya reaktion blev i stigende grad anvendt til kvantificering af aminosyrer, såsom tryptophan og tyrosin, som led af forskellige proteiner.